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长片段大量质粒提取试剂盒

品牌:Thmorgan

型号:TMG0004

产地:中国

一、产品用途:

大型/大量质粒提取试剂盒

二、产品特点:

1.   不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、方便、从 150-200ml 大肠杆菌 LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取 0.5-2mg 纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达 80-90 %。

2.   获得的质粒产量高,超螺旋比例可高达 95%,浓度可达 5μg/μl,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。

3.   内毒素含量极低(< 0.1EU/μg DNA),可直接应用于细胞转染。

三、产品介绍:

本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒 DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA 等杂质,获得高质量的质粒 DNA。纯化 DNA 的 OD260/280 通常在 1.8 左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对 DNA 纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在 1.5ml 小离心管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA 的丢失。本方法提取纯化质粒DNA, 对质粒损伤小,即使是 10kb 甚至 100kb 以上的大型质粒或超大型 BAC/PAC 质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。可选择任意小体积溶解质粒,浓度可高达5μg/μl。超螺旋比例可高达 95%,无内毒素,转染效果好。

 

四、储存条件:

1.   第一次使用时,将试剂盒所带全部的 RNase A 加入溶液 P1 后(终浓度 100μg /ml) 置于 4℃保存。如果溶液 P1 中 RNase A 失活,提取的质粒可能会混杂有微量 RNA 残留,在溶液 P1 中补加 RNase A 即可。

2.   内毒素清除剂在 4℃可保存一个月,如果要长期保存,建议保存在-20℃!

3.   环境温度低时溶液 P2 中 SDS 可能会析出出现浑浊或者沉淀,可在 37℃水浴加热几分钟,即可恢复澄清,不要剧烈摇晃,以免形成过量的泡沫。

4.   避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH 值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。

五、应用实例:

          竞品1       竞品2    本试剂               竞品1      竞品2      本试剂

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不同产品均采用相同体积的洗脱液进行洗脱,分别上样1μl,判断质粒浓度;并依据吸光值浓度上样100mg,判断是否存在虚高现象。

结论:电泳检测低拷贝质粒,本品得率最高;竞品存在明显的虚高现象。


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