品牌:Thmorgan
型号:TMG0025
产地:中国
一、产品用途:
第一链cDNA合成。可用于高拷贝、低拷贝基因的检测。
二、产品介绍:
本产品是一种高效、稳定、快速并可以去除基因组DNA污染的反转录系统。试剂盒采用分子进化技术多点突变的新一代反转录酶,大幅度提高了稳定性和反转录效率。本试剂盒为一管式反转录预混MiX 5×TRUE RT Master MixII中含有反转录第一链合所需的所有试剂(TRUEscript HˉRTase、RNase Inhibitor、Randomprimers、Oligo dT Primer、dNTP Mixture、Buffer)。通常RealTimeRT-PCR等实验需要先用DNaseI消化去除RNA中残留的基因组DNA(gDNA),但是传统DNaseI处理复杂并容易造成RNA的降解和损失。本试剂盒中使用了具有DNA分解活性的特殊4×gDNA Eraser Mix 2分钟消除gDNA残留,不需要DNase消化和后续繁琐步骤。
三、产品特点:
1. 新一代反转录酶大幅度提高了稳定性和反转录效率。
2. 采用gDNAEraser仅需2分钟清除DNA残留,不需要DNase消化和后续繁琐步骤。
3. 全预混的反转录Mix,只需加入RNA和水,15分钟简单快速完成反转录。
4. 同时2种Mix在-20℃不易冻结,减少了化冻和混匀时间,使用更简单。
5. 本产品针对qPCR进行特别优化oligodT和N6随机引物配比,使cDNA合成可从RNA转录本的各个区域起始并具有相同的反转录效率,最大程度保证了qPCR结果的真实性和可重复性。
四、储运温度:-20℃保存,有效期12个月。
五、应用实例:
方法:以1g Hela细胞RNA(有基因组残留)为模板,对TNF-alpha基因(引物设计在外显子上,可以cDNA或基因组为模板进行扩增)进行荧光定量PCR检测。
结果:如图所示,2组可反映RNA中基因组的残留情况,3组可准确反映TNF-alpha的真实表达水品,1组因基因组残留而导致最终定量结果发生错误,4组表明本产品可以去除RNA中残留的基因组DNA。
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